杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司

背景：我們對兒童生命早期食物過敏的危險因素知之甚少。方法：這項瑞典全國性群組研究，使用了來自衛(wèi)生保健登記簿中2001-2012年在瑞典出生的1086378名兒童的前瞻性記錄數(shù)據(jù)。我們采用Cox回歸分析，估計95%置信區(qū)間的危險比（HRs）于衛(wèi)生保健登記簿中的圍產(chǎn)期特征（如剖腹產(chǎn)和早產(chǎn)）和確診的食物過敏之間的關(guān)系，并對嬰兒性別和母親因素進行了校正（分娩年齡、出生地、產(chǎn)次、吸煙、體重指數(shù)、哮喘/肺病）。

①兒童過敏性和非過敏性哮喘的嚴重程度可能受到微生物暴露的影響②我們試圖研究家庭微生物暴露與兒童哮喘嚴重程度之間的關(guān)系。③參與者(n = 196)是從康涅狄格州和馬薩諸塞州的一組哮喘兒童中挑選出來的。兒童按哮喘嚴重程度(輕度無癥狀或有最小癥狀需藥物治療或中度至重度持續(xù)性)和特應(yīng)性狀態(tài)(由血清IgE水平?jīng)Q定)進行分組。采用下一代DNA測序和定量PCR法測定室內(nèi)粉塵中的微生物群落結(jié)構(gòu)和濃度。利用Logistic回歸研究哮喘嚴重程度與暴露指標之間的關(guān)系，包括豐度、微生物種類鑒定和量化、群落組成、總真菌和細菌濃度。

①早期鼻腔微生物群的動態(tài)建立影響局部粘膜免疫反應(yīng)和兒童呼吸道疾病的易感性。②本病例對照研究的目的是監(jiān)測、評估和比較患有鼻炎和喘息的嬰兒在出生后18個月與健康對照組嬰兒鼻微生物群的發(fā)育情況。③對122名新加坡健康成長(GUSTO)出生隊列受試者的前鼻拭子進行了為期18個月的7個時間點的縱向收集。采用16S rRNA多路雙端測序法對3組臨床患者(1)單純鼻炎患者(28例)、鼻炎伴喘息患者(34例)和健康對照組(60例)進行鼻微生物區(qū)系特征分析。

①屋塵螨(HDM)是吸入性過敏原的主要來源，占全球過敏病例的50%以上，而屋塵螨過敏原的全譜尚不清楚。在這里，我們測序了一個高質(zhì)量的戶塵螨（Der p）基因組，以發(fā)現(xiàn)已知的典型過敏原和從粉塵螨在（Der f）基因組衍生出的過敏原同源物。②采用PacBio、Illumina和離子激流讀的混合組裝方法組裝了戶塵螨（Der p）基因組。用Cufflinks比較Der p和Der f 的轉(zhuǎn)錄組。采用二維凝膠電泳法和MALDI-ToF MS鑒定過敏原，通過ELISA法用病人血清與細菌表達的重組蛋白結(jié)合的方法檢測新過敏原的變應(yīng)原性。

①背景：慢性鼻竇炎合并鼻息肉(CRSwNP)的特點是局部產(chǎn)生多克隆IgE亞型。雖然組織IgE的濃度可以達到幾千KU/L，但是對于IgE介導(dǎo)的炎癥在鼻息肉患者中的調(diào)控機制還不是很清楚。②方法：我們試圖確定鼻息肉患者局部誘導(dǎo)的IgG抗體是否能夠抑制IgE介導(dǎo)的促過敏反應(yīng)。收集花粉過敏的慢性鼻竇炎合并鼻息肉（CRSwNP）患者和非過敏對照組的鼻腔息肉勻漿。采用免疫固相變應(yīng)原芯片法測定IgE水平。我們評估了含有IgE 的鼻息肉勻漿(有或無IgG消耗)在促進IgE誘導(dǎo)的過敏原表達、嗜堿性細胞活化和組胺釋放方面的能力。采用免疫球蛋白454測序法評價局部IgE和IgG譜。

①背景：在過敏原特異性免疫治療(AIT)期間，過敏原特異性IgG4增加。在本研究中，我們研究了在AIT過程中針對塵螨個體主要過敏原的特異性IgG4。②方法：對塵螨敏感的變應(yīng)性鼻炎(52例)患者，采用標準化的螨蟲提取物進行皮下免疫治療。僅接受藥物治療的對塵螨敏感的過敏性鼻炎患者作為對照(n=14)。分別在AIT前、6個月和12個月后檢測各組對Dp、d.farina(Df)及相應(yīng)的主要過敏原(Dp1和Df1)和2組(Dp2和Df2)的特異性IgE和IgG4。

①與用其他變應(yīng)原提取物進行特異性免疫治療相比，用真菌變應(yīng)原提取物進行免疫治療的有效性和安全性研究較少，對交鏈孢霉主要變應(yīng)原Alt a1的研究也未見報道。②我們試圖評估2種不同劑量的Alt a1皮下免疫治療由鏈格孢引起的鼻結(jié)膜炎的療效和安全性。③我們進行了一項多中心、隨機、雙盲、安慰劑對照試驗，對年齡在12至65歲之間的過敏性鼻結(jié)膜炎合并或不合并哮喘的患者進行皮下注射Alt a1。三組包括:安慰劑組和每劑接受0.2或0.37μg Alt 1的兩組治療組治療。主要終點為癥狀與用藥評分的結(jié)合。次要終點為皮膚反應(yīng)性、針對Alt a1的血清IgE和IgG4水平的變化。不良反應(yīng)的記錄按照世界過敏組織的標準進行分級。

①人類對貓的過敏通常是由貓的主要過敏原Fel d1引起的，約10%的西方人群中存在貓過敏。目前，沒有治療貓過敏的有效和安全方法。過敏患者通常的應(yīng)對方法是盡量避免和貓的接觸或治療他們的過敏癥狀。②我們開發(fā)了一種新的策略，用自身主要過敏原Fel d1對貓進行免疫，來治療人類受試者由Fel d1引起的過敏。③采用重組Fel d 1與來源于黃瓜花葉病毒的病毒樣顆粒組成的聯(lián)合疫苗對貓進行免疫【黃瓜花葉病毒含有破傷風(fēng)毒素衍生的通用T細胞表位tt830-843 (CuMVTT)】。首次單獨或聯(lián)合使用Fel-CuMVTT疫苗進行耐受性和免疫原性研究，包括增量注射。

過敏原特異性IgE檢測及臨床病史是過敏診斷的基礎(chǔ)。在過去的幾十年里，過敏原提取物的特征描述和標準化及以檢測技術(shù)都得到了提高。在這里，我們討論了ImmunoCAP IgE檢測方法(Thermo Fisher Scientific/Phadia, Uppsala, Sweden)在變態(tài)反應(yīng)學(xué)領(lǐng)域的用途、優(yōu)點、誤解和局限性。它們可以進行單一(ImmunoCAP)檢測，近十年來，可進行多重(免疫固相變應(yīng)原芯片[ISAC])檢測。ImmunoCAP的主要優(yōu)點是獲得定量的過敏原特異性IgE抗體水平，且不受過敏原特異性IgG抗體的干擾。然而，ImmunoCAP過敏原提取物受提取物成分的限制。過敏原分子的引入對分析特異性和過敏診斷產(chǎn)生了重要影響。它們被用于單一ImmunoCAP和多重 ImmunoCAP ISAC檢測。ISAC的主要優(yōu)點是用微量血清獲得的綜合IgE圖譜。缺點是它只能半定量檢測，線性范圍較窄，以及每次檢測的成本較高。就檢測性能而言，ImmunoCAP過敏原提取物是很好的篩選工具，但過敏原分子在分子水平上分析IgE反應(yīng)，將過敏研究推向精準醫(yī)學(xué)的位軌道。

過敏性肺炎(HP)是一種TH1淋巴細胞偏向性纖維性肺泡炎，由多種抗原引起，包括禽排泄物、真菌、嗜熱細菌和原生動物，以及工作場所發(fā)現(xiàn)的反應(yīng)性化學(xué)物質(zhì)。與病毒綜合征相似，急性暴露于刺激抗原可導(dǎo)致突然出現(xiàn)無生產(chǎn)能力的咳嗽、呼吸困難、伴有關(guān)節(jié)痛的寒戰(zhàn)或不 適，通常在4至8小時后發(fā)生，因此抗原暴露與癥狀之間的時間關(guān)系可能沒有受到懷疑。HP組織學(xué)表現(xiàn)為明顯的淋巴細胞浸潤，使肺泡間隔增厚，伴有肉芽腫或巨細胞。幾乎所有患者的支氣管肺泡灌洗液中淋巴細胞都超過20%。高分辨率計算機斷層檢查的異常情況：從急性/亞急性疾病的結(jié)節(jié)性小葉中心混濁到晚期疾病患者典型的以上葉為主的網(wǎng)狀斑紋和蜂窩狀纖維化。描述詞匯包括“鑲嵌樣”衰減和毛玻璃混濁。反復(fù)發(fā)作可導(dǎo)致結(jié)節(jié)性肺浸潤和可疑的非特異性間質(zhì)性肺炎或特發(fā)性肺纖維化。在廣泛的肺纖維化或限制性肺疾病發(fā)生之前，臨床醫(yī)生需要高度懷疑才能對HP做出早期診斷。美國胸科學(xué)會的一個專家小組評論道:“對于懷疑患有間質(zhì)性肺病的患者進行BAL，我們建議淋巴細胞亞群分析不是BAL細胞分析的常規(guī)組成部分。什么構(gòu)成了對診斷的“高度自信”是一個有爭議的問題。在沒有診斷試驗的情況下，診斷需符合臨床癥狀、刺激(誘導(dǎo))抗原、異常高分辨率計算機斷層掃描(CT)、肺功能檢測、抗原特異性IgG抗體的證據(jù)、部分患者需肺活檢。

過敏原特異性免疫治療(AIT)是臨床治療過敏的一種經(jīng)濟有效的方法，可改變疾病的進程，并具有長期的效果。然而，基于過敏原提取物形式的AIT需要多次給藥，這使得治療很麻煩，導(dǎo)致患者依從性差。為了解決這一問題，人們提出了許多方法，包括使用安全性更高的AIT材料，如類變應(yīng)原、重組變應(yīng)原衍生物和變應(yīng)原衍生肽，這些材料可以縮短累積階段

花粉過敏患者在食用植物性食物(水果、蔬菜和香料)時也經(jīng)常出現(xiàn)過敏癥狀，某些花粉過敏與食物不耐受的關(guān)系，導(dǎo)致了臨床綜合征出現(xiàn)，如芹菜-艾蒿-樺樹花粉綜合征，蘋果-樺樹花粉綜合征，以及類似的現(xiàn)象。早在10多年前就有研究表明，與花粉和食物蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)的IgE抗體可能是引起上述臨床現(xiàn)象的原因。

過敏原特異性IgE檢測及臨床病史是過敏診斷的基礎(chǔ)。在過去的幾十年里，過敏原提取物的特征描述和標準化及以檢測技術(shù)都得到了提高。在這里，我們討論了ImmunoCAP IgE檢測方法(Thermo Fisher Scientific/Phadia, Uppsala, Sweden)在變態(tài)反應(yīng)學(xué)領(lǐng)域的用途、優(yōu)點、誤解和局限性。它們可以進行單一(ImmunoCAP)檢測，近十年來，可進行多重(免疫固相變應(yīng)原芯片[ISAC])檢測。ImmunoCAP的主要優(yōu)點是獲得定量的過敏原特異性IgE抗體水平，且不受過敏原特異性IgG抗體的干擾。然而，ImmunoCAP過敏原提取物受提取物成分的限制。過敏原分子的引入對分析特異性和過敏診斷產(chǎn)生了重要影響。它們被用于單一ImmunoCAP和多重 ImmunoCAP ISAC檢測。ISAC的主要優(yōu)點是用微量血清獲得的綜合IgE圖譜。缺點是它只能半定量檢測，線性范圍較窄，以及每次檢測的成本較高。就檢測性能而言，ImmunoCAP過敏原提取物是很好的篩選工具，但過敏原分子在分子水平上分析IgE反應(yīng)，將過敏研究推向精準醫(yī)學(xué)的位軌道。

①背景：在過去的幾十年里，基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)對目前有關(guān)個性化過敏原組份的知識及其在診斷IgE介導(dǎo)的過敏方面的潛在應(yīng)用做出了貢獻。最近的研究表明，Alt a1被認為是孢子菌屬的相關(guān)過敏原，烯醇化酶是真菌交叉反應(yīng)的主要過敏原。然而，這些過敏原作為診斷變應(yīng)原過敏的工具的真正用途仍不清楚。②目的：展示現(xiàn)有真菌過敏原系列組份的價值，以及建立準確的霉菌過敏原陣列以診斷對孢菌科過敏的必要性。③方法：在30位鏈格孢屬過敏患者和100位捐獻者的血液中，用ImmunoCAP?系統(tǒng)檢測單個真菌過敏原和真菌過敏原提取物的特異性IgE。交叉反應(yīng)研究采用單個過敏原和過敏原提取物的熒光酶免疫法(FEIA)和FEIA抑制法。用雙向電泳結(jié)合MALDI-TOF分析的方法識別新的過敏原分子。

在出生隊列中有系統(tǒng)地應(yīng)用變應(yīng)原分子的研究表明，特應(yīng)性致敏是IgE對來自同一變應(yīng)原來源(即分子傳播)的不同非交叉反應(yīng)分子（從引發(fā)分子開始）的連續(xù)反應(yīng)。根據(jù)個體的特應(yīng)性傾向和過敏原暴露情況，這種連續(xù)現(xiàn)象的程度不同 (單分子、低分子和多分子)，從而使患者群體中的IgE致敏譜的差異極大。在變應(yīng)性鼻炎患者中，IgE分子致敏譜越寬，哮喘等變應(yīng)性合并病的風(fēng)險越大，如口腔變態(tài)反應(yīng)綜合征。

背景：益生菌在預(yù)防和治療氣道疾?。òㄟ^敏）方面的靶向應(yīng)用越來越受到關(guān)注。在此，我們研究了益生菌鼠李糖乳桿菌gg和鼠李糖乳桿菌gr-1預(yù)防性鼻內(nèi)治療過敏性哮喘小鼠模型的有益效果。方法：在第1-4天和第8-11天，以5x108 cfu/劑量鼻內(nèi)給藥鼠李糖乳桿菌8次，然后在兩周的哮喘誘導(dǎo)方案中交替給藥白樺花粉提取物。根據(jù)血清抗體水平、支氣管肺泡灌洗液細胞計數(shù)、肺組織學(xué)、肺細胞因子水平和氣道高反應(yīng)性分析預(yù)防性治療的效果。通過鼻粘膜、糞便樣本、頸部淋巴結(jié)和血液中細菌細胞計數(shù)來評估鼠李糖乳桿菌的定植和易位。熒光顯微鏡觀察鼠李糖乳桿菌與固定的小鼠鼻粘膜細胞和氣道巨噬細胞的結(jié)合。

①哮喘是兒童最常見的慢性病。最近，我們在小鼠和加拿大嬰兒的生命早期發(fā)現(xiàn)了一個重要的窗口，在此期間，腸道微生物變化(失調(diào))影響哮喘的發(fā)展?？紤]到全球人類腸道微生物群的地理差異，我們研究了生活在不同發(fā)展中國家環(huán)境中的人群腸道微生物失調(diào)對過敏性哮喘的影響。②我們試圖確定嬰兒早期的微生物變化是否與非工業(yè)化環(huán)境下的過敏性哮喘的發(fā)展有關(guān)。③方法我們在厄瓜多爾農(nóng)村的一個出生隊列中進行了一項病例對照研究，其中我們確定了27名患有過敏性哮喘的兒童和70名5歲的健康對照受試者。我們使用16S和18S測序分析了3個月大的糞便樣本中的細菌和真核菌群。利用16S rRNA數(shù)據(jù)，通過重建未觀察到的狀態(tài)，對群落進行系統(tǒng)發(fā)育研究，利用《京都基因百科全書》和基因組本體論對細菌的功能進行分類，預(yù)測細菌的元基因組。采用氣相色譜法測定糞便短鏈脂肪酸的濃度。

①食物過敏是一個日益嚴重的公共衛(wèi)生問題，也是危及生命的過敏反應(yīng)的最常見原因。常規(guī)過敏試驗評估過敏原特異性IgE的存在，明顯高估了真實的臨床過敏率，導(dǎo)致過度診斷和對健康相關(guān)生活質(zhì)量的不良影響。②為了對一種新的診斷工具進行初步驗證和評估，我們使用了肥大細胞活化測試(MAT)。③人原發(fā)性血源性肥大細胞(MCs)由外周血前體細胞產(chǎn)生，經(jīng)患者血清敏化后與過敏原孵育。采用流式細胞術(shù)和介質(zhì)釋放法檢測MC脫顆粒情況。我們將MATs的診斷性能與現(xiàn)有的診斷工具進行了比較，以評估在接受雙盲安慰劑對照挑戰(zhàn)的花生致敏受試者隊列中的診斷性能。

腸道微生物群在免疫系統(tǒng)發(fā)育和免疫反應(yīng)調(diào)控中起著重要作用。本文綜述了新生兒和兒童腸道微生物群與過敏、濕疹和哮喘的關(guān)系。總的來說，桿菌科、梭菌科和腸桿菌科相對豐度較高，雙歧桿菌科和乳酸菌科相對豐度較低，與過敏、濕疹或哮喘的發(fā)生有關(guān)。細菌多樣性的減少可能與變應(yīng)性疾病的發(fā)生有關(guān)。與新生兒相比，年齡較大的兒童腸道微生物群的組成與過敏性疾病或哮喘的發(fā)展之間的關(guān)系不太一致，這表明早期生活中微生物的接觸扮演著更重要的角色。不同研究報告的結(jié)果不一致，部分原因可能是設(shè)計、研究群體、診斷標準、微生物群分析方法和不同分類水平的報告的異質(zhì)性。更大規(guī)模的研究能更好地解釋產(chǎn)前和產(chǎn)后因素，這將有助于進一步確定與過敏和哮喘風(fēng)險增加相關(guān)的特定腸道微生物特征。這將使我們能早期識別高危嬰兒，并促進預(yù)防和治療這些疾病的新策略和干預(yù)措施的形成，包括在生命早期修改腸道微生物群。

背景：過敏性疾病已成為富裕社會的主要公共衛(wèi)生問題之一。生命早期的微生物定植似乎對指導(dǎo)兒童免疫系統(tǒng)成熟和過敏發(fā)展的調(diào)節(jié)至關(guān)重要。盡管口腔是大多數(shù)外來抗原與免疫系統(tǒng)接觸的第一個部位，但口腔細菌對過敏反應(yīng)發(fā)展的影響還沒有很多報道。